Электронная библиотека Веда
Цели библиотеки
Скачать бесплатно
Доставка литературы
Доставка диссертаций
Размещение литературы
Контактные данные
Я ищу:
Библиотечный каталог российских и украинских диссертаций

Вы находитесь:
Диссертационные работы России
Медицинские науки
Социальная медицина

Диссертационная работа:

Полякова Виктория Олеговна. Геропротекторное и регуляторное действие пептидов на клетки тимуса : Дис. ... канд. биол. наук : 14.00.53 : Санкт-Петербург, 2003 119 c. РГБ ОД, 61:04-3/174-0

смотреть содержание
смотреть введение
Содержание к работе:

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ .4

ВВЕДЕНИЕ 6

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 11

Глава 1. МОЛЕКУЛЯРНО-КЛЕТОЧНЫЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ,
ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ И СТАРЕНИЯ ТИМУСА
11

  1. Биология развития и анатомия тимуса 12

  2. Типы клеток и гормоны тимуса 19

  3. Дифференцировка клеток тимуса и их иммуноцито-химический фенотип 27

  4. Нейроэндокринная регуляция функционирования тимуса 29

  5. Тимус и старение 33

  6. Вилон и эпиталон: роль и значение в нейроиммуно-эндокринной регуляции ....; .39

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ .43

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ .43

  1. Исследования in vitro 43

  2. Исследования in vivo 45

Глава 3. ДЕЙСТВИЕ ВИЛОНА И ЭПИТАЛОНА НА ЭПИТЕЛИАЛЬ
НЫЕ КЛЕТКИ ТИМУСА
50

  1. Экспрессия маркеров активации 50

  2. Секреторная функция 53

  3. Пролиферативная активность при старении культур 58

  4. Экспрессия белков ядрышковых организаторов 60

Глава 4. ДЕЙСТВИЕ ВИЛОНА И ЭПИТАЛОНА НА ТИМОПИТЫ 64

  1. Экспрессия маркеров активации ; 64

  2. Апоптоз 67

4.3. Экспрессия белков ядрышковых организаторов 68

Глава 5. ДЕЙСТВИЕ ВИЛОНА И ЭПИТАЛОНА НА ПЕРИФЕРИ
ЧЕСКИЕ Т-ЛИМФОЦИТЫ
71

  1. Пролиферация и апоптоз лимфоцитов 71

  2. Внутриклеточный синтез цитокинов 76

Глава 6. ВЛИЯНИЕ ВИЛОНА НА МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ

СОСТОЯНИЕ ТИМУСА ПРИ ПРЕЖДЕВРЕМЕННОМ
(РАДИАЦИОННОМ) СТАРЕНИИ
78

  1. Световая микроскопия 78

  2. Электронная микроскопия 80

  3. Иммуногистохимические и гистохимические исследования. Компьютерный анализ микроскопических изображений .....87

  1. Контрольная группа (1 группа) 87

  2. Преждевременное старение (действие ионизирующей радиации (2 группа)) 88

  3. Сочетанное действие радиации и вилона (3 группа) 88

  4. Действие вилона (4 группа) 89

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 92

Глава 7. ОСОБЕННОСТИ ДЕЙСТВИЯ ПЕПТИДОВ НА КЛЕТКИ

ТИМУСА В ПРОЦЕССЕ ИХ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ И

СТАРЕНИЯ 92

ВЫВОДЫ 104

УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ 106

Список сокращений: АБП метод иммуногистохимический метод авидин - биотин -

пероксидазного комплекса
АКТГ аденокортикотропный гормон

Г-КСФ колониестимулирующий фактор гранулоцитов

ГМ-КСФ гранулоцитарныи и моноцитарныи колониестимулирующий

фактор

МНС главный комплекс гистосовместимости

. )

\' MP транспортный белок

*:

:) MR манозный рецептор

N / mm2 число тучных клеток на 1 mm2 площади среза

PCNA пролиферативный клеточный ядерный антиген

TCR Т-клеточный рецептор

#)

Введение к работе:

Актуальность темы

Известно, что возрастные изменения тимуса играют ключевую роль в ослаблении системы клеточного и гуморального иммунитета у лиц пожилого и старческого возраста [103]. Инволюция тимуса сопровождается глубокими изменениями морфологии клеток микроокружения и недостаточной выработкой нейропептидов, цитокинов и гормонов, регулирующих функциональную активность органов иммунной системы и созревание Т-лимфоцитов [80]. Ускоренное старение тимуса, протекающее с подобной картиной, наблюдается также на фоне химиотерапевтического лечения, жесткого радиационного облучения и в условиях длительного стресса [87]. Поиск и исследование пептидов с высокой биологической активностью, способных регулировать и восстанавливать адаптационные реакции организма является приоритетным направлением современной биологии.

Участие нейрогуморальных пептидных факторов, вырабатываемых клетками тимусного микроокружения в процессах гемопоэза и формировании иммунного ответа, послужило предпосылкой к созданию на их основе лекарственных препаратов нового поколения. На основе аминокислотного анализа природных препаратов тимуса и эпифиза в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН были сконструированы синтетические пептиды вилон (Lys-Glu) и эпиталон (Ala-Glu-Asp-Gly), обладающие выраженными иммуномодулирующими свойствами [46].

Сравнительное изучение действия вилона и эпиталона на эпителиальные клетки тимуса и Т-лимфоциты в процессе их дифференцировки и старения позволит более глубоко понять механизмы функционирования и возрастной инволюции тимуса, а также разработать подходы к пептидергической регуляции иммунных и эндокринных функций железы в процессе старения организма.

>

Цель и задачи исследования

Целью диссертационного исследования является сравнительное изучение действия вилона и эпиталона на эпителиальные клетки тимуса и Т-лимфоциты в процессе их дифференцировки и старения.

Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

  1. изучить действие пептидов на дифференцировку тимоцитов;

  2. исследовать влияние вилона и эпиталона на пролиферацию и апоптоз Т-лимфоцитов;

  3. определить эффекты действия вилона и эпиталона на экспрессию маркеров активации и на секреторную активность эпителиальных клеток тимуса (ТЭК);

  4. оценить влияние пептидов на синтез внутриклеточных цитокинов;

  5. изучить влияние пептидов на пролиферативный потенциал ТЭК при старении культур;

  6. изучить функциональную морфологию тимуса крыс в радиационной модели ускоренного старения;

  7. оценить геропротекторные свойства изучаемых пептидов - вилона и эпиталона.

Научная новизна работы

В работе впервые получены данные о роли пептидов (вилона и эпиталона) в регуляции функций эпителиальных клеток тимуса и Т-лимфоцитов при старении. Установлены внутриклеточные пептидергические механизмы, участвующие в процессах пролиферации и дифференцировки и старения клеток тимуса. Проведен анализ морфо-функциональных изменений в тимусе при ускоренном старении. Выявлено геропротекторное и регуляторное действие вилона и эпиталона по отношению к клеткам тимуса.

Практическая значимость работы

Полученные результаты позволяют расширить представления о влиянии пептидов на развитие и функционирование клеток иммунной системы, в первую очередь Т-лимфоцитов и эпителиальных клеток тимуса. Установленное геропротекторное и регуляторное действие вилона и эпиталона на клетки тимуса открьшают перспективы для детального изучения возможности применения пептидов в гериатрической практике для коррекции функций, нарушенных при старении организма.

Положения выносимые на защиту

  1. Вилон и эпиталон обладают регуляторным действием на клетки тимуса in vitro, изменяя экспрессию активационных антигенов CD54, HLA-DR, CD69 на их поверхности.

  2. Вилон и эпиталон проявляют геропротекторные свойства при старении культур клеток тимуса человека, ослабляя апоптоз и усиливая пролиферацию ТЭК.

  3. Вилон стимулирует репаративные процессы в тимусе крыс при ускоренном (радиационном) старении.

  4. Вилон и эпиталон могут рассматриваться как потенциальные иммуно- и геропротекторы.

Связь с научно - исследовательской работой Института

Диссертационная работа является темой, выполняемой по основному плану НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и указателя литературы. Глава 1 (обзор литературы) представляет собой анализ данных литературы по функциональной морфологии тимуса и роли пептидов в регуляции иммунных и эндокринных функций железы. Глава 2 посвящена описанию материалов и методов, используемых в данном исследовании. Главы 3-6 представляют собственные экспериментальные данные изучения эффектов действия пептидов на ТЭК, тимоциты, периферические Т-лимфоциты и на структурно-функциональную организацию тимуса в модели преждевременного старения in vivo. В главе 7 обсуждаются полученные результаты. Текст диссертации изложен на 119 страницах, содержит 15 таблиц, иллюстрирован 26 рисунками. Список литературы содержит 129 источников, из которых отечественных - 82.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ.

Апробация и реализация диссертации

Материалы диссертации доложены на Четвертой Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2001); II Российской конференции молодых ученых «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2001); V научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге 2001» (Санкт-Петербург, 2001); научно-практической конференции с международным участием «Актуальные проблемы коррекционной психологии, психотерапии, медицины» (Санкт-Петербург, 2001); Пятой Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей «Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2002); второй

научной конференции с международным участием, посвященной 80-летию со дня рождения профессора М.Г. Колпакова «Эндокринная регуляция физиологических функций в норме и патологии» (Новосибирск, 2002); Седьмой Санкт-Петербургской ассамблее молодых ученых и специалистов (Санкт-Петербург, 2002).

Результаты диссертации используются в научно-практической работе в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, Санкт-Петербургском Государственном университете, Санкт-Петербургской академии последипломного образования МЗ РФ. Исследования, проводимые в рамках диссертационной работы поддержаны грантом РФФИ 02-04-49873 и j/ грантом для студентов, аспирантов и молодых специалистов Администрации Санкт-Петербурга и Российской академии наук в 2002 г.

Подобные работы
Гумен Антонина Владимировна
Функциональная активность клеток иммунной системы при стрессе и старении : Модулирующее действие коротких пептидов
Чеснокова Анастасия Юрьевна
Возрастные изменения пролиферативной активности клеток тимуса человека
Ким Кира Фаритовна
Влияние синтетических аналогов пептидов тимуса на продукцию цитокинов и фагоцитарную активность клеток периферической крови
Крылов Андрей Витальевич
Экспрессия генов фактора роста эндотелия сосудов и тромбоспондина-1 в клетках тимуса и перитонеальных макрофагах мышей при опухолевом росте
Шевченко Марина Александровна
Механизмы гипосенсибилизирующего действия пептидов, полученных протеолизом мажорного аллергена Asp f 2 из грибов Aspergillus fumigatus
Дырдуева Наталья Балдановна
Оценка иммунокорригирующего действия фракции тимуса, иммобилизованной на цеолите, при вторичном иммунодефицитном состоянии
Плеснёва Светлана Александровна
Аденилатциклазный сигнальный механизм действия пептидов инсулинового суперсемейства у позвоночных и беспозвоночных
Долотов Олег Валентинович
Механизмы действия пептида Семакс на центральную нервную систему: роль нейротрофинов
Титарева Галина Михайловна
Влияние структуры липополисахарида на устойчивость Yersinia pestis к бактерицидному действию катионных антимикробных пептидов и комплемента сыворотки
Некрасова Марина Михайловна
Модуляция гепарином антиноцицептивного действия нейролептиков и регуляторных пептидов

© Научная электронная библиотека «Веда», 2003-2013.
info@lib.ua-ru.net