Диссертационная работа:

Голубева Александра Андреевна. Изучение полиморфных вариантов некоторых генов-кандидатов ИБС у русских мужчин молодого и среднего возраста : диссертация ... кандидата медицинских наук : 14.00.06 / Голубева Александра Андреевна; [Место защиты: ГОУВПО "Московская медицинская академия"].- Москва, 2008.- 98 с.: ил.

Список используемых сокращений 4

Введение 5

Глава 1. Обзор литературы 9

1.1 .Введение 9

1.2.Гены белков метаболизма и транспорта липидов. 9

1.2.1 .Ген аполипопротеин Е. 11

1.2.2.Ген липопротеинлипазы. 14

1.2.3 .Ген белка переносчика эстерифицированного холестерина. 17

1. Гены белков свертывающей системы крови. 18 1.3.1 .Ген коагуляционного фактора II 19 1.3.2. Ген фактора V.Лейденовская мутация 22 1.3.3.Ген метилентетрагидрофолатредуктазы 24 1.3.4.Ген ингибитора активатора плазминогена 27

2. Ген ангиотензинпревращающего фермента 28

3. Ген синтазы окиси азота 30

4. Заключение 31 Глава 2. Материал и методы исследования 33 2.1. Объект исследования 33 2.2.Критерии включения в исследование 33

5. Критерии исключения из исследования 33

6. Методы клинического исследования 33

7. Методы генетического исследования 38

8. Статистический анализ 43 Глава 3. Результаты клинического обследования 45

1. Распределение больных по группам 45

2. Факторы риска ИБС 46 Глава 4. Результаты генетического исследования 53

3. Анализ ассоциаций полиморфного маркера гена АРОЕ с ИБС 53

4. Анализ ассоциаций полиморфного маркера S447 LPL с ИБС 55

5. Анализ ассоциаций полиморфных маркеров TaqlB и I405A гена 56 СЕТР

6. Анализ ассоциаций генов метаболизма и транспорта липидов с 58 факторами ИБС: курение, ожирение, отягощенная наследственность

4.6. Анализ ассоциаций G/T полиморфизма гена эндотелиальной 62
синтазы оксида азота с ишемической болезнью сердца

6. Анализ ассоциаций полиморфного маркера гена eNOS и факторов 63 риска ИБС (курение, ожирение, отягощенная наследственность).

7. Анализ ассоциаций I/D полиморфизма гена ангиотензин- .- 64 превращающего фермента с ИБС

8. Гены-кандидаты белков свертывающей системы крови и анализ 66 ассоциаций полиморфных вариантов с ИБС.

Глава 5. Обсуждение 70

Выводы 80

Практически рекомендации 81

Список литературы 82

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

Актуальность проблемы. Одним из основных направлений в здравоохранении является разработка эффективных мер профилактики заболеваний, на долю которых приходится наиболее высокий процент инвалидизации и смертности среди населения большинства высокоразвитых стран [Оганов Р.Г., 1999]. В первую очередь к ним относятся ишемическая болезнь сердца (ИБС). Давно известно, что факторами риска развития ИБС являются курение, ожирение, артериальная гипертензия (АГ), гиперхолестеринемия (ГХС), малоподвижный образ жизни, сахарный диабет. Однако, в последнее время появились работы, свидетельствующие, что наряду с факторами внешней среды существует также генетическая предрасположенность к этому заболеванию.

За последнее десятилетие был обнаружен целый ряд мутаций, приводящих к раннему развитию ИБС и инфаркта миокарда (ИМ). На сегодняшний день описано более 700 различных мутаций гена рецептора липопротеина низкой плотности (РЛПНП), изменяющих аминокислотную структуру белка, в результате которых нарушается взаимодействие этого рецептора с ЛПНП и липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП) [Hobbs HH, 1992; Мандельштам М.Ю, 2002]. Это является причиной семейной гиперхолестеринемии, что приводит к раннему развитию ИБС и ИМ. Мутация гена аполипопротеина В (АРОВ) 3500ArgGln приводит к замене аминокислоты аргинин на глутаминовую кислоту вблизи от центра связывания с РЛПНП. Это также нарушает взаимодействие рецептора с ЛПНП и приводит к такой же клинической картине что и мутации гена РЛПНП: ГХС и раннему развитию ИБС и ИМ [Hixson J.E, 1992]. Однако, эти мутации крайне редки: они встречаются с частотой не более чем 1 случай на 500-700 человек и поэтому не могут объяснить генетические основы этих заболеваний.

В ходе расшифровки генома человека были выявлены многочисленные полиморфные варианты ДНК, когда у разных людей в определенном положении находятся разные нуклеотиды. Такие изменения также являются мутациями, однако, поскольку они расположены в участках, некодирующих белки, либо они не нарушают аминокислотную структуру белков, их принято называть однонуклеотидными полиморфизмами или SNP. На сегодняшний день в геноме человека обнаружено более 1 000 000 SNP [Lander ES,2001] Отличающиеся варианты ДНК по определенному положению называют аллелями. Для сравнительного анализа проводят типирование SNP, у которых частота реже встречающегося аллеля превышает 5%. Хотя SNP и не меняют аминокислотную структуру белков, они могут изменять регуляторные участки генов и, таким образом, определять количество соответствующего белка, либо могут оказаться сцепленными с другими функционально-значимыми мутациями, которые пока остаются неизвестными.

Цель исследования: Изучить у больных ишемической болезнью сердца полиморфные варианты некоторых генов-кандидатов с целью оценить их роль в качестве маркеров возникновения заболевания.

Задачи исследования:

1. Изучить распределение частот генотипов полиморфных маркеров, изучаемых генов-кандидатов ИБС: гена аполипопротеина Е (АРОЕ), гена липопротеинлипазы (LPL), гена белка переносчика эстерифицированного холестерина (CЕТР), гена синтазы окиси азота (еNOS), гена метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR), гена фактора V (F5), гена протромбина (F2), гена ингибитора активатора плазминогена (PAI-1), гена ангиотензинпревращающего фермента (ACE) у русских мужчин, проживающих в Москве и Подмосковье, страдающих ИБС и в контрольной группе;

2. Провести анализ ассоциаций полиморфных вариантов генов-кандидатов ИБС с факторами риска заболевания;

3. Провести анализ ассоциаций полиморфных вариантов генов-кандидатов ИБС с содержанием липидов в сыворотке крови (ОХС, ХСЛВП, ХСЛНП, ТГ);

4. Провести анализ ассоциаций полиморфных вариантов генов-кандидатов ИБС с показателями свертывающей системы крови (фибриноген, протромбиновый индекс (ПИ), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ)).

Научная новизна: У русских мужчин, проживающих в Москве и Подмосковье, с помощью современных методов исследования, впервые охарактеризованы частоты генотипов полиморфных вариантов генов-кандидатов одновременно нескольких систем. Проведен анализ ассоциаций полиморфных вариантов изучаемых генов-кандидатов с риском развития ИБС, а также с показателями липидного спектра и свертывающей системы крови. Результаты настоящего исследования могут служить отправными данными для дальнейшего изучения и поиска генетических факторов риска ИБС.

Практическая значимость работы.

1. Анализ ассоциаций полиморфных маркеров генов-кандидатов ИБС может быть использован для выявления лиц, угрожающих по развитию данного заболевания и последующего проведения донозологической профилактики.

2. Данные об ассоциациях полиморфных маркеров генов-кандидатов ИБС можно рекомендовать в практике медико-генетического консультирования для определения риска развития сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений;

3. Информация об ассоциациях полиморфных вариантов генов-кандидатов ИБС может быть использована в области генетической эпидемиологии, а также в популяционной генетике.

Положения, выносимые на защиту:

1. Наряду с факторами внешней среды, существует генетическая предрасположенность к ишемической болезни сердца.

2. Для выявления молекулярно-генетических факторов, определяющих предрасположенность к ИБС, можно проводить анализ SNP, расположенных внутри и/или вблизи генов с потенциально наибольшим вкладом в патогенез заболевания.

3. С развитием ишемической болезни сердца, у русских мужчин молодого и среднего возраста, ассоциированы полиморфные маркеры гена АРОЕ, еNOS, PAI-1.

4. Внедрение молекулярно-генетичесикх исследований в клиническую практику даст возможность выявлять группы риска по развитию и неблагоприятному течению сердечно-сосудистых заболеваний.

Внедрение результатов работы: Методика определения полиморфных маркеров генов-кандидатов сердечно-сосудистых заболеваний внедрена в практику клиники кардиологии ММА им.И.М.Сеченова.

Апробация диссертации: проведена 05 декабря 2007 года на совместном заседании Кафедры профилактической и неотложной кардиологии ФППОВ, клиники кардиологии, отдела кардиологии НИЦ ММА им.И.М.Сеченова

Публикации: по теме диссертации опубликовано 4 печатных работ.

Структура и объем диссертации: