Электронная библиотека Веда
Цели библиотеки
Скачать бесплатно
Доставка литературы
Доставка диссертаций
Размещение литературы
Контактные данные
Я ищу:
Библиотечный каталог российских и украинских диссертаций

Вы находитесь:
Диссертационные работы России
Медицинские науки
Онкология

Диссертационная работа:

Лысюк Елена Юрьевна. Экспрессия белков, регулирующих апоптоз, на лейкозных клетках разных этапов В-клеточной дифференцировки : диссертация ... кандидата биологических наук : 14.00.14.- Москва, 2004.- 114 с.: ил. РГБ ОД, 61 04-3/942

смотреть содержание
смотреть введение
Содержание к работе:

Содержание 2

список сокращений 4

ВВЕДЕНИЕ 5

Актуальность темы 5

Цель работы 6

Задачи исследования 6

Научная новизна 6

Научно-практическая значимость 7

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8

Глава 1. Морфологические и биохимические характеристики

апоптоза 8

Индукция апоптоза. 9

Эффекторная стадия , 10

Стадия деградации //

Глава 2. Белки, коіггролирующие процесс апоптоза в клетке 12

Семейство Bcl-2 подобных белков. 12

Р53. 17

CD95 (Fas/APO-1) 19

Глава 3. Экспрессия онкомаркеров приВ-клеточных

лнмфопролиферативных заболеваниях 21

Стадии дифферепцировки В-лимфогпшюв и связяпные с ними

заболевания человека. 21

Экспрессия апоптотическах биомаркеров на ранних стадиях

дифферепцировки В-клеток. 22

Экспрессия апоптотических биомаркеров на зрелых клетках. 25

ЧАСТЬ II. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИИ 38

Глава 1. Материалы и методы 38

  1. Моиоклоналъпые и политональные антитела (МКА) 38

  2. Реактивы 39

  3. Общая характеристика использованного в работе материала, 40

  4. Пробоподготовка 42

  1. Окрашивание клеток 42

  2. ПроточиО'Цитометрическгш анализ 46

1JМикроскопический анализ 47

1.8 Программное обеспечение 47

Глава 2. Исследование экспрессии лпоптотических белков при

лимфопролиферативных заболеваниях 49

Изучение экспрессии белков группы Bcl-2 51

Изучение экспрессии р53 68

Изучение экспрессии CD95 77

Глава 3. Обсуждение результатов 83

ВЫВОДЫ 95

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 96

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

БСЛ- бычий сывороточный альбумин

ВСЗ - высокой степени злокачественности

В-ХЛЛ - В-клеточный хронический лимфоцитарный лейкоз

ДАБ - 3,3-Диаминобензидин

ДКЛ - диффузно-крупноклеточная лимфома

ЗЦ- зародышевый центр

НХЛ - неходжкинские лимфомы

КМ - костный мозг

ЛГМ - лимфогранулематоз

Л/у - лимфоузел (лимфоузлы)

МКА - моноклональные антитела

МКЛ - мантийно-клеточная лимфома, лимфома из клеток зоны мантии

ММ - множественная миелома

НСЗ - низкой степени злокачественности

ОЛ - острый лейкоз

ОЛЛ - острый лимфобластный лейкоз

ПК - периферическая кровь

ПК А - поликлональные антитела

РИФ - реакция иммунофлуоресценции

ТМ - трансмембранный

ФЛ - фолликулярная лимфома

ХЛЛ - хронический лимфоцитарный лейкоз

Cytс - цитохром С

FITC - изотиоцианат флуоресцеина

МАЬТома - MALT-лимфома

РЕ - фикоэритрин

Введение к работе:

Актуальность темы.

Устойчивость опухоли к проводимой терапии - одна из проблем, наиболее остро стоящих перед современной онкологией. Причин возникновения подобной резистентности множество, и одна из них - неспособность клсток активировать программу клеточной гибели (апоптоз).

Программированная клеточная гибель - нормальный физиологический процесс, происходящий, в частности, при дифференцировке клеток различной природы, в том числе лимфоцитов. Как известно, все клетки крови развиваются из штіорипотентной стволовой клетки; при развитии лимфоцитарного ростка гемопоэза до момента получения зрелых лимфоцитов происходит гибель до 90% предшественников и сохраняются только клетки с функционально-активными рецепторами. Несмотря на существование данных о том, что гибель клеток происходит путем апоптоза, нет точных сведений, на какой стадии дифференцировки задействован тот или иной механизм индукции апоптоза.

Нарушения в программе дифференцировки клеток крови приводит к развитию гематологических заболеваний, в том числе лейкозов. Четкое понимание механизмов клеточного и молекулярного контроля нормального развития клеток крови может дать ключ к ответу на вопрос о происхождении и лечении этих заболеваний.

Лимфопролнферативные заболевания представляют собой накопление или пролиферацию клеток лимфоидного ряда на определенной стадии дифференцировки. Поэтому мы использовали эти заболевания в качестве модельной системы для изучения механизмов индукции апоптоза на этапах дифференцировки лимфоидных клеток.

Многие формы гемобластозов, в том числе В-клеточного происхождения, достаточно тяжело поддаются лечению. И хотя в последние годы достигнуты значительные успехи в терапии неходжкинских лимфом (НХЛ), у большого

количества больных все же ие удается достичь ремиссии при применении современных режимов химиотерапии. Исходя из этого, возникает необходимость в определении тех критериев, которые помогли бы выявить больных, требующих других, возможно более агрессивных, типов лечения.

К распространению опухолевых клеток могут приводить мутации онкогенов и генов - опухолевых супрессоров. Эти изменения могут снижать эффективность противоопухолевых агентов, так как действие многих цитотоксических препаратов и радиоактивного облучения приводит к гибели клеток путем апоптоза. Таким образом, изучение путей, задействованных в регуляции апоптоза нормальных и опухолевых гемопоэтических клеток, может способствовать разработке усовершенствованных методов терапии при лечении лейкозов и лимфом.

Цель работы.

Целью работы было исследовать экспрессию регуляторов апоптоза, таких как CD95, ВсІ-2, р53т Вах, а также их соотношение на различных стадиях дифференцировки В-лимфоцитов человека.

Задачи исследования.

  1. Исследовать экспрессию регулирующих апоптоз онкобелков Вс1-2 и Вах и их соотношение в лейкозных В-клетках разных степеней дифференцировки;

  2. Исследовать экспрессию про-апоптотического белка р53 на примере различных лимфопролиферативных заболеваний.

  3. Исследовать экспрессию CD95 на стадиях дифференцировки В-клеток.

  4. Изучить взаимное соотношение экспрессии Вс1-2, Вах, р53 и CD95 в клетках и корреляционные связи между ними.

Научная новизна

С помощью одних и тех же моноклопальных антител была изучена экспрессия апоптотических белков на широком спектре гемобластозов.

Выявлены различия в экспрессии Вс1-2 па этапах дифференцировки В-лимфоцитов человека: высокая экспрессия белка обнаружена на стадиях периферических В-клеток при гемобластозах. Вс1-2 отсутствовал при заболеваниях, соответствующих стадиям ранних и активированных В-клеток, и на стадии плазматических клеток.

Выявлена зависимость экспрессии Вс1-2 от цитологического типа фолликулярной лимфомы.

Обнаружено большое количество экспрессирующих Вс1-2 клеток при хроническом лимфолейкозе. Их число значительно снижалось в случае достижения клшшко-гематологической ремиссии. Одновременно с этим наблюдалось снижение значения соотношения Bct-2/Bax.

НАУЧ НО-П РАКТИ ЧЕСКАЯ 3 ЫАЧ И М О СТЬ.

Выбранные нами методы определения экспрессии внутриклеточных онкомаркеров могут быть использованы в клинической практике.

Выявление экспрессии Вс1-2 при острых лимфобластных лейкозах может быть признаком быстрого рецидивирования и может требовать более агрессивного лечения.

Исследование Вс1-2 и соотношения ВсІ-2/Вах при хроническом лимфолейкозе может использоваться как дополнительный фактор, подтверждающий достижение или не достижение клшшко-гематологической ремиссии на молекулярном уровне.

Члсть і. Обзор литературы.

Подобные работы
Лобанова Юлия Сергеевна
Исследование молекулярного механизма развития и поддержания эстрогеннезависимого роста клеток рака молочной железы человека: роль сигнальных белков STAT3, PI3K и NF-kappa B
Вайман, Андрей Владимирович
Участие многофункционального белка YB-1 в регуляции Р-гликопротеина и в ответе клетки на стресс
Мурашко Дмитрий Александрович
Адреналинзависимая регуляция экспрессии белков теплового шока 70 кДа в лимфоидных клетках [Электронный ресурс]
Капланов Камиль Даниялович
Экспрессия белков p53 и bcl-2 при лимфогранулематозе как индикатор эффективности химиотерапиии первой линии
Максимова Анна Владимировна
Растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы при бронхиальной астме у детей
Салимгареева Миляуша Хамитовна
Влияние бромпроизводного аминоадамантана - ладастена на активность протеинкиназ и фосфорилирование белков в клетках головного мозга и печени крыс
Сапожников Александр Михайлович
Функции белков теплового шока в популяциях лимфоидных клеток
Гусарова Галина Алексеевна
Экзоцитоз и транслокация на клеточную поверхность белков теплового шока 70 КДА в популяциях лимфоидных клеток
Пупышев Александр Борисович
Исследование гетерофаговой функции клеток печени крыс на модели неспецифического адсорбционного эндоцитоза белка
Бушуева Наталия Вадимовна
Клиническое значение определения РНК и структурных белков вируса гепатита С в ткани печени, мононуклеарных клетках и сыворотке крови больных хроническим гепатитом С

© Научная электронная библиотека «Веда», 2003-2013.
info@lib.ua-ru.net