Электронная библиотека Веда
Цели библиотеки
Скачать бесплатно
Доставка литературы
Доставка диссертаций
Размещение литературы
Контактные данные
Я ищу:
Библиотечный каталог российских и украинских диссертаций

Вы находитесь:
Диссертационные работы России
Медицинские науки
Гистология, цитология, эмбриология

Диссертационная работа:

Дворчик Елена Евгеньевна. Оценка параметров иммунной системы с учетом хемотаксической активности фагоцитов у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания : диссертация ... кандидата медицинских наук : 14.00.36 / Дворчик Елена Евгеньевна; [Место защиты: ГОУВПО "Челябинская государственная медицинская академия"].- Челябинск, 2009.- 165 с.: ил.

смотреть содержание
смотреть введение
Содержание к работе:

стр.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ПРИНЯТЫХ В ДИССЕРТАЦИИ 5

ВВЕДЕНИЕ 7

ГЛАВА 1. Некоторые изменения параметров иммунной системы
у больных бронхиальной астмой (обзор литературы) 14

  1. Определение бронхиальной астмы 16

  2. Классификация бронхиальной астмы 23

  1. Лабораторные показатели иммунитета у больных БА 27

  2. Механизмы регуляции девиации иммунного ответа 32

  3. Физиология и морфология хемотаксиса нейтрофилов 39

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 56

  1. Иммунологические методы исследования 58

  2. Статистические методы исследования 83

ГЛАВА 3. Сравнительный анализ показателей состояния
гранулоцитов у больных атопической и смешанной бронхиальной
астмой в фазы клинической ремиссии и обострения
заболевания__ 88

  1. Анализ показателей лейкограммы у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания 85

  2. Анализ показателей функционального состояния нейтрофилов у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии

и обострения заболевания 90

3.3. Анализ показателей локомоторной функции нейтрофилов
у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой

в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания_ 92

ГЛАВА 4. Сравнительный анализ показателей состояния
лимфоцитов и гуморального звена иммунитета у больных
атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы
клинической ремиссии и обострения заболевания 106

4.1. Анализ показателей иммунофенотипирования
лимфоцитов у больных атопической и смешанной
бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии

и обострения заболевания 106

  1. Анализ показателей функционального состояния лимфоцитов у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания 112

  2. Анализ показателей гуморального звена иммунитета у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой

в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания 114

ГЛАВА 5. Сравнительный анализ показателей цитокинового
статуса у больных атопической и смешанной бронхиальной
астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания 118

5.1. Анализ продукции интерлейкина 1(3 у больных
атопической и смешанной бронхиальной астмой

в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания 119

  1. Анализ продукции интерферона гамма у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания 121

  2. Анализ продукции интерлейкина 4 у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения

заболевания 123

5.4. Анализ продукции интерлейкина 10 у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой

в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания 125

ЗАКЛЮЧЕНИЕ 132

ВЫВОДЫ 150

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 152

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 153

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ПРИНЯТЫХ В ДИССЕРТАЦИИ:

АФН — активность фагоцитоза нейтрофилов

АЭ - активность неспецифических эстераз

БА - бронхиальная астма

ВИЧ — вирус иммунодефицита человека

ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа

ГНТ - гиперчувствительность немедленного типа

ИАД - индекс адгезии

ИАЭ — индекс активности неспецифических эстераз

ИСЦК - индекс суммарного цитохимического коэффициента эстеразной

активности

ИХ - индекс хемотаксиса

ИФН - интенсивность фагоцитоза нейтрофилов

ИД - индекс девиации

ИП/А - индекс соотношения провоспалительных цитокинов к

антивоспалительным цитокинам

ИСЛЛ - индекс суммарной люминесценции лизосом

ЛПС - липополисахарид Esherihia coli

МІЖ - мононуклеары периферической крови

НСТ-тест - тест восстановления нитросинего тетразолия.

СН50 - активность комплемента по 50% гемолизу

С1, С2, СЗ, С4, С5 - фрагменты комплемента С1, С2, СЗ, С4, С5

СЦК - суммарный цитохимический коэффициент эстеразной активности

СПЛ - спонтанная пролиферация лимфоцитов

ФГАї-ИПЛ - ФГА]. индуцированная пролиферация лимфоцитов

ФГАг.-ИПЛ - ФГА2. индуцированная пролиферация лимфоцитов

ЛПС - ИПЛ - ЛПС- индуцированная пролиферация лимфоцитов

ФАТ — фактор, активирующий тромбоциты

ФГА - фитогемагглютинин

ЦИК - циркулирующие иммунные комплексы

CD - кластер дифференцировки

FITC — флуоресцеина изотиационат

Ig А, М, G, Е - иммуноглобулины А, М, G, Е

Th - Т-хелперы

IL1 р — интерлейкин 1Р

IL4 - интелейкин 4

IL10- интерлейкин 10

IFNy - интерферон у

NK - натуральные киллеры

РЕ - фикоэритрин

Введение к работе:

Актуальность темы. Направленная миграция является важнейшим проявлением реактивности нейтрофилов, основной смысл которой заключается в достижении объекта, вызвавшего активацию клетки (очаг тканевой деструкции, воспаления). Активированный нейтрофил, пришедший в очаг, решает эффекторные задачи одним из двух способов: либо с помощью фагоцитоза, либо путем секреции биологически активных продуктов (Зурочка А.В., 1991; Долгушин И.И., Бухарин О.В., 2001; Долгушин И.И. и др., 2006). Сложность клеточных и гуморальных механизмов, которые обеспечивают хемотаксис, делает его одной из самых уязвимых форм реактивности нейтрофила (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989). Характер изменений фагоцитарной и хемотаксической активности нейтрофилов подробно изучен при многих гнойно-воспалительных процессах, при острой патологии и травматической болезни (Зурочка А.В., 1991; Студеникина Ю.Н., 2000; Долгушин И.И., Бухарин О.В., 2001; Злакоманова О.Н., 2002; Долгушин И.И. и др., 2006). Не менее важна роль фагоцитов при аллергопатологии, в частности, бронхиальной астме (БА). Однако в формировании данного заболевания часто важную патогенетическую роль играет инфекционное звено, что, с одной стороны, может поддерживать активность аллергического воспаления, а, с другой стороны, аллергическое заболевание при длительном течении (или лечении) приводит к изменениям иммунного статуса по типу вторичной иммунной дисфункции, клиническим проявлением которой являются рецидивирующие хронические воспалительные заболевания. С точки зрения клинико-лабораторной оценки, такие поражения иммунной системы являются наиболее сложными для верификации иммунологического диагноза (Федосеева В.Н. и др., 2004) и требуют индивидуальной тактики ведения больного и иммунокоррекции этих состояний, где важную роль играют именно фагоциты, обеспечивающие первую линию защиты от инфекции и играющие немаловажную роль в поддержании аллергического воспаления в различных органах и системах. Таким образом, формирование инфекционной зависимости у этих больных БА происходит в результате воздействия различных инфекционных агентов; первые клинические проявления или обострения течения БА связаны с воздействием инфекционных факторов, а улучшение состояния возникает после снижения патогенного влияния инфекционного агента. В настоящее время очевидна необходимость диагностики активной и скрытой инфекции у таких больных, так как это тесно связано с выбором адекватной терапии, что определяет актуальность и служит обоснованием цели настоящего исследования.

Цель исследования: изучить характер изменений хемотаксической и фагоцитарной функции нейтрофилов периферической крови у больных

атопической и смешанной бронхиальной астмой на фоне изменения иммунного статуса в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания. Задачи исследования:

  1. Изучить состояние фагоцитарного звена иммунной системы у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания.

  2. Определить характер хемотаксической активности фагоцитов на причинно-значимые аллергены, бактериальные хемоаттрактанты, С5а фрагмент системы комплемента и естественный цитокиновый комплекс у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания.

  3. Провести сравнительное исследование состояния лабораторных параметров лимфоцитарного и гуморального звеньев иммунитета у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания.

  4. Определить уровень спонтанной и индуцированной продукции цитокинов у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания для оценки состояния регуляторного звена иммунной системы.

Научная новизна. Впервые определен характер хемотаксической активности нейтрофилов на причинно-значимый аллерген у больных атопической и смешанной БА в фазы клинической ремиссии и обострения заболевания. Изучен хемотаксический ответ на бактериальный хемоаттрактант, С5а фрагмент комплемента и естественный цитокиновый комплекс, что позволило выяснить некоторые особенности формирования ответа фагоцитарных клеток у таких больных и выявить значимость этих нарушений в формировании данной патологии. Кроме того, изучены лабораторные показатели иммунной системы: иммунофенотип лимфоцитов, фагоцитарные свойства, кислородзависимый метаболизм, лизосомальная активность, миграционные характеристики нейтрофилов периферической крови, гуморальное звено иммунитета, цитокиновый статус у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в зависимости от фазы клинической ремиссии или обострения заболевания.

Впервые показано, что при воздействии специфических хемоатграктантов - взвеси суточной культуры S. aureus штамм «Cowan 209» и специфического аллергена, выявлен феномен хемотаксической деактивации к инфекционному агенту на фоне активации неспецифических эстераз у больных смешанной БА, как в фазе обострения, так и в фазе клинической ремиссии, а к причинно-значимому аллергену данный феномен выявлен у больных атопической БА, также независимо от стадии заболевания, при отсутствии метаболической активации нейтрофилов в зоне хемотаксического ответа, что способствует длительному поддержанию воспалительного процесса.

Отсутствие хемотаксической деактивации при ответе на аллерген у больных смешанной БА, возможно, свидетельствует о перераспределении роли аллергена и микроорганизма в формировании данной патологии в сторону инфекционного агента. Подана заявка на патент РФ «Способ выявления нарушения функции фагоцитов при развитии рецидивирующих инфекционных процессов» № 2007108220.

Теоретическая и практическая значимость работы. Теоретическая значимость результатов исследования состоит в расширении знаний о характере иммунологических нарушений и особенностях функциональной активности нейтрофилов у больных атопической и смешанной БА в фазы клинической ремиссии или обострения заболевания.

Выявленные нарушения хемотаксических реакций нейтрофилов периферической крови и оценка их патогенетического значения, а также зафиксированные разнонаправленные изменения состояния иммунной системы позволят разработать новые методы диагностики нарушений иммунной системы у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой в зависимости от фазы клинической ремиссии или обострения заболевания. На основе исследования разработан метод выявления нарушения функций фагоцитов при развитии рецидивирующих инфекционных процессов.

Положения, выносимые на защиту:

  1. У больных атопической и смешанной бронхиальной астмой наблюдается угнетение фагоцитарной функции и снижение резерва кислородзависимого метаболизма нейтрофилов периферической крови, независимо от фазы процесса.

  2. У больных атопической бронхиальной астмой наблюдается феномен хемотаксической деактивации при воздействии причинно-значимого аллергена при отсутствии метаболической активации нейтрофилов в зоне хемотаксического ответа, а у больных смешанной бронхиальной астмой -при воздействии инфекционного агента - взвеси суточной культуры Staphylococcus aureus штамм «Cowan 209» - на фоне активации неспецифических эстераз как в фазе обострения, так и в фазе клинической ремиссии.

  3. При иммунофенотипировании лимфоцитов у больных атопической и смешанной бронхиальной астмой отмечается снижение числа клеток, экспрессирующих активационные рецепторы, независимо от фазы заболевания.

  4. У больных атопической бронхиальной астмой в стадию обострения по сравнению с группой больных атопической бронхиальной астмой в фазу клинической ремиссии увеличивается соотношение CD4+/CD8+. У больных смешанной бронхиальной астмой в стадию ремиссии по сравнению с группой практически здоровых лиц снижается соотношение CD4+/CD8+. У больных смешанной бронхиальной астмой в стадии

обострения по сравнению с группой пациентов, находящихся в стадии клинической ремиссии, повышается соотношение CD4+/CD8+ за счет увеличения количества С04-позитивных лимфоцитов на фоне снижения уровня CD8+ клеток. 5. У больных атонической и смешанной бронхиальной астмой, независимо от фазы заболевания, отмечаются однонаправленные изменения в продукции цитокинов: снижение продукции ILip и IFNy и увеличение продукции IL4 и IL10 в фазу ремиссии при относительном снижении IL4 в фазе обострения.

Внедрение результатов в практику. Результаты исследования внедрены в практику отделения аллергологии и иммунологии Клиники ЧелГМА, лаборатории экологической иммунологии НИИ иммунологии ЧелГМА, в учебный процесс самостоятельного курса клинической лабораторной диагностики ЧелГМА.

Апробация работы. Результаты проведенных исследований доложены и обсуждены на Всероссийском научном Форуме имени академика В.И. Иоффе Дни иммунологии в Санкт-Петербурге «Молекулярные основы иммунорегуляции, иммунодиагностики и иммунотерапии» (г. Санкт-Петербург, 2005, 2006,2007), Конференции иммунологов Урала (г. Челябинск, 2003; г. Оренбург, 2006). Работа была поддержана грантом Правительства Челябинской области (2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 170 страницах машинописного текста и содержит введение, обзор литературы, материалы и методы, 3 главы собственных исследований, заключение, выводы, практические рекомендации, список литературы. Указатель литературы включает 152 источника, из них 97 отечественных и 55 иностранных. Иллюстрации представлены 14 таблицами, 4 рисунками и 4 фотографиями.


© Научная электронная библиотека «Веда», 2003-2013.
info@lib.ua-ru.net